光學(xué)顯微鏡的基礎(chǔ)知識

　　顯微鏡術(shù)語　普通光學(xué)顯微鏡的基本工作原理是利用物鏡和目鏡的多組凸透鏡將物像逐級放大并反射到視網(wǎng)膜上的過程。而顯微鏡的性能和質(zhì)量的高低可通過分辨率、數(shù)值孔徑、總放大倍率等指標(biāo)來反映。

　　(1)分辨率：衡量光學(xué)系統(tǒng)分辨相隔微小距離的兩個點能力的指標(biāo)，即“能夠分辨兩點之間最小距離的能力”，稱之為光學(xué)系統(tǒng)的分辨率。一個光學(xué)系統(tǒng)它所能分辨的兩點之間的距離愈小，分辨率也就越高。

　　(2)數(shù)值孔徑：數(shù)值孔徑(N.A.)是決定物鏡和聚光鏡性能的一個重要參數(shù)。用下式表示：

　　這里n是在物鏡、透鏡和聚光鏡與標(biāo)本之間的一種介質(zhì)(空氣、浸油等)的折射率，而α則是孔徑角的一半。數(shù)值孔徑越大，圖像就越明亮，分辨率越高。

　　(3)總放大倍率：顯微鏡的總放大倍率=單個物鏡的放大倍率×目鏡的放大倍率。

　　(4)光學(xué)筒長：是指從觀察筒下端的結(jié)像透鏡到插入目鏡處的鏡筒頂端的長度。

　　(5)工作距離：指當(dāng)一個標(biāo)本圖像被清晰聚焦時，從物鏡的前端到蓋玻片的上表面的距離。通常，物鏡的放大倍率越高，其工作距離便越短。

　　(6)物方視場：是指標(biāo)本在顯微鏡下實際能被觀察到圓形區(qū)域的直徑(mm)。

　　(7)景深：指在對標(biāo)本某一斷面聚焦的狀態(tài)下，該面前后同時能被看清的景物范圍(深度)。物鏡的N.A.值(數(shù)值孔徑)越大，景深越淺。