熒光分析方法

　　熒光學(xué)分析法是利用待測(cè)定組分所顯示出的吸收光譜或發(fā)射光譜，既包括原子光譜也包括分子光譜。利用被測(cè)定組分中的分子所產(chǎn)生的吸收光譜的分析方法，即通常所說的可見與紫外分光光度法、紅外光譜法;利用其發(fā)射光譜的分析方法，常見的有熒光光度法。利用被測(cè)定組分中的原子吸收光譜的分析方法，即原子吸收法;利用被測(cè)定組分的發(fā)射光譜的分析方法，包括發(fā)射光譜分析法、原子熒光法、X射線原子熒光法、質(zhì)子熒光法等。

　　熒光分析法

　　當(dāng)紫外光照射到某些物質(zhì)的時(shí)候，這些物質(zhì)會(huì)發(fā)射出各種顏色和不同強(qiáng)度的可見光，而當(dāng)紫外光停止照射時(shí)，這種光線也隨之很快地消失，這種光線稱為熒光。

　　第一次記錄熒光現(xiàn)象的是16世紀(jì)西班牙的內(nèi)科醫(yī)生和植物學(xué)家N.Monardes，1575年他提到在含有一種稱為“LignumNephriticum”的木頭切片的水溶液中，呈現(xiàn)了極為可愛的天藍(lán)色，在17世紀(jì)，Boyle(1626—1691)和Newton(1624—1727)等著名科學(xué)家再次觀察到熒光現(xiàn)象，倒置顯微鏡倒置顯微鏡倒置顯微鏡倒置顯微鏡。并且給予更詳細(xì)的描述。盡管在17世紀(jì)和18世紀(jì)中還發(fā)現(xiàn)了其它一些發(fā)熒光的材料和溶液，然而在解釋熒光現(xiàn)象方面卻幾乎沒有什么進(jìn)展。

　　直到1852年Stokes在考察奎寧和葉綠素的熒光時(shí)，用分光計(jì)觀察到其熒光的波長(zhǎng)比入射光的波長(zhǎng)稍為長(zhǎng)些，才判明這種現(xiàn)象是這些物質(zhì)在吸收光能后重新發(fā)射不同波長(zhǎng)的光，而不是由光的漫射作用所引起的，從而導(dǎo)入了熒光是光發(fā)射的概念，他還由發(fā)熒光的礦物“螢石”推演而提出“熒光”這一術(shù)語。Stokes還對(duì)熒光強(qiáng)度與濃度之間的關(guān)系進(jìn)行了研究，描述了在高濃度時(shí)以及外來物質(zhì)存在時(shí)的熒光猝滅現(xiàn)象。此外，他似乎還是第一個(gè)(1864年)提出應(yīng)用熒光作為分析手段的人。

　　1867年，Goppelsr—ouml;der)進(jìn)行了歷史上首次的熒光分析工作，應(yīng)用鋁—桑色素配合物的熒光進(jìn)行鋁的測(cè)定。1880年，Liebeman提出了最早的關(guān)于熒光與化學(xué)結(jié)構(gòu)關(guān)系的經(jīng)驗(yàn)法則，到19世紀(jì)末，人們已經(jīng)知道了包括熒光素、曙紅、多環(huán)芳烴等600種以上的熒光化合物。

　　20世紀(jì)以來，熒光現(xiàn)象被研究得更多了。例如，1905年Wood發(fā)現(xiàn)了共振熒光;1914年Frank和Hertz利用電子沖擊發(fā)光進(jìn)行定量研究;1922年Frank和Cario發(fā)現(xiàn)了增感熒光;1924年Wawillous進(jìn)行了熒光產(chǎn)率的絕對(duì)測(cè)定;1926年Gaviola進(jìn)行了熒光壽命的直接測(cè)定等等。

　　熒光分析方法的發(fā)展，與儀器應(yīng)用的發(fā)展是分不開的。19世紀(jì)以前，熒光的觀察是靠肉眼進(jìn)行的，直到1928年，才由Jette和West提出了第一臺(tái)光電熒光計(jì)。早期的光熒光顯微鏡熒光顯微鏡熒光顯微鏡電熒光計(jì)的靈敏度是有限的，1939年Zworykin和Rajchman發(fā)明光電倍增管以后，在增加靈敏度和容許使用分辨率更高的單色器等方面，是一個(gè)非常重要的階段。1943年Dutton和Bailey提出了一種熒光光譜的手工校正步驟，1948年由Studer推出了第一臺(tái)自動(dòng)光譜校正裝置，到1952年才出現(xiàn)商品化的校正光譜儀器。

　　近十幾年來，在其它學(xué)科迅速發(fā)展的影響下，隨著激光、微處理機(jī)和電子學(xué)的新成就等一些新的科學(xué)技術(shù)的引入，大大推動(dòng)了熒光分析法在理論方面的進(jìn)展，促進(jìn)了諸如同步熒光測(cè)定、導(dǎo)數(shù)熒光測(cè)定、時(shí)間分辨熒光測(cè)定、相分辨熒光測(cè)定、熒光偏振測(cè)定、熒光免疫測(cè)定、低溫?zé)晒鉁y(cè)定、熒光顯微鏡熒光顯微鏡熒光顯微鏡固體表面熒光測(cè)定、熒光反應(yīng)速率法、三維熒光光譜技術(shù)和熒光光纖化學(xué)傳感器等熒光分析方面的某些新方法、新技術(shù)的發(fā)展，并且相應(yīng)地加速了各式各樣新型的熒光分析儀器的問世，使熒光分析法不斷朝著高效、痕量、微觀和自動(dòng)化的方向發(fā)展，方法的靈敏度、準(zhǔn)確度和選擇性日益提高，方法的應(yīng)用范圍大大擴(kuò)展，遍及于工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生、環(huán)境保護(hù)、公安情報(bào)和科學(xué)研究等各個(gè)領(lǐng)域中。

　　如今，熒光分析法已經(jīng)發(fā)展成為一種重要且有效的光譜化學(xué)分析手段。在我國(guó)，50年代初期僅有極少數(shù)的分析化學(xué)工作者從事熒光分析方面的研究工作，但到了70年代后期，熒光分析法已引起國(guó)內(nèi)分析界的廣泛重視，在全國(guó)眾多的分析化學(xué)工作者中，已逐步形成一支從事這一領(lǐng)域工作的隊(duì)伍偏光顯微鏡偏光顯微鏡近年來，國(guó)內(nèi)發(fā)表的有關(guān)熒光分析方面的論文數(shù)量增長(zhǎng)較快，所涉及的內(nèi)容也已從經(jīng)典的熒光分析法逐步擴(kuò)展到新近發(fā)展起來的一些新方法和新技術(shù)，在儀器應(yīng)用方面也陸續(xù)有幾種類型的國(guó)產(chǎn)的熒光分析光度計(jì)問世，為這一分析方法的發(fā)展和普及提供了一定的物質(zhì)條件。