基因組DNA提取純化的注意事項(xiàng)

　　從血液樣本中純化DNA
　　血液樣本可以是新鮮或凍存全血或干血片，由于血液樣本在采集后會(huì)迅速凝固，所以通常在采血時(shí)使用EDTA，檸檬酸鹽或肝素進(jìn)行抗凝。經(jīng)過抗凝處理的血液樣本可以直接用于 DNA純化，需要注意的是使用的DNA純化方法需要能夠去除上述抗凝劑，以免干擾下游 PCR檢測。全血也可以在DNA純化前先進(jìn)行白細(xì)胞富集等再進(jìn)行DNA純化。
　　從血液中純化DNA的產(chǎn)量很大程度上取決于血液中的白細(xì)胞數(shù)量，而白細(xì)胞數(shù)量則和血液的供體情況有很大關(guān)聯(lián)（如貧血或感染都會(huì)造成白細(xì)胞數(shù)量變化）。上述情況必須在進(jìn)行DNA純化前就應(yīng)該考慮到。此外，有些動(dòng)物有有核血，這意味著這類樣本中含有更多的 DNA，在從此類血樣中純化DNA，上樣量需要減少10倍左右。

　　從細(xì)胞中純化DNA
　　哺乳動(dòng)物細(xì)胞可以使用蛋白酶K進(jìn)行裂解。
　　酵母細(xì)胞需要首先使用溶菌酶對細(xì)胞壁進(jìn)行處理，然后使用蛋白酶或蛋白酶 K 進(jìn)行消化。
　　許多細(xì)菌細(xì)胞可以使用裂解buffer和蛋白酶/蛋白酶K進(jìn)行裂解，某些細(xì)菌如革蘭氏陽性菌需要預(yù)先使用溶菌酶對細(xì)胞壁進(jìn)行處理。
　　細(xì)菌細(xì)胞需要先從生物體液中沉淀，然后從中純化細(xì)菌DNA，拭子樣本需要先使用殺菌劑進(jìn)行預(yù)處理然后再離心。
　　使用機(jī)械裂解會(huì)比用酶消化的效果要好，尤其是針對革蘭氏陽性菌或真菌而言。