反相色譜柱的平衡方法

反相色譜柱的平衡方法

    聚合物基質(zhì)的反相色譜柱采用了聚甲基丙烯酸酯聚合物，制備而成具有不同孔徑和粒徑大小的各種規(guī)格的產(chǎn)品。TSKgel 聚合物基質(zhì)反相色譜柱適用于較寬的pH范圍，即使在高pH下也具有很好的重復(fù)性。這類色譜柱在pH2-12下表現(xiàn)出極其穩(wěn)定的化學(xué)特性。因此，在硅膠基質(zhì)色譜柱適用受限的堿性pH下仍然可以使用。

    反相色譜柱載經(jīng)過出廠測(cè)試后是保存在乙腈-水中的；由于色譜柱在儲(chǔ)存或運(yùn)輸過程中固定相可能會(huì)干擾，這會(huì)引起鍵合相的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，因此，新的色譜柱在用來分析樣品之前，請(qǐng)一定要充分平衡色譜柱。

    反相色譜柱的平衡方法是：以純乙腈或甲醇作為流動(dòng)相，首先用低流速0.2ml/min將色譜柱平衡過夜（請(qǐng)注意斷開液相色譜儀檢測(cè)器）。 

    然后，將流速增加到0.8ml/min沖洗30min以便將色譜柱的填料充分平衡至zui佳狀態(tài)。平衡過程中，將流速緩慢地提高至獲得穩(wěn)定的基線，這樣可以保證色譜柱的使用壽命，并保證在以后的使用中，獲得分析結(jié)果的重現(xiàn)性。

    請(qǐng)一定確保所使用的流動(dòng)相和乙腈-水互溶。如果您所使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽，應(yīng)注意首先用20倍柱體積的5%的乙腈-水流動(dòng)相過渡，然后使用分析樣品的流動(dòng)相直至獲得穩(wěn)定的基線。